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| GATA-3基因表达质粒的构建及在大鼠脑细胞中的表达 |
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作者：俞 琼 杨… 文章来源：中山大学中山眼科中心 510060 点击数： 更新时间：2004-6-17 
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| 【目的】 构建GATA-3基因正义、反义重组质粒，为进一步研究GATA-3在T细胞发育分化中的作用提供基础。 【方法】 用PCR技术扩增GATA-3基因，通过酶切、连接、转化等分子生物学技术，将该全长基因亚克隆至表达载体pCDNA3，构建质粒后转染大肠杆菌，并在大肠杆菌中扩增。同时用脂质体法感染大鼠脑细胞。【结果】从大鼠脑细胞中成功地克隆出全长1335 bp的GATA-3基因，并经序列分析筛选证实GATA-3基因以正向、反向重组转染入载体，且在大肠杆菌中得到扩增，同时用RT-PCR方法检测到反义重组体对大鼠脑细胞表达该基因具有抑制作用。【结论】成功构建了GATA-3基因正义、反义表达质粒，并初步证实反义GATA-3具有抑制细胞正常表达作用，为深入研究GATA-3对T细胞发育分化的影响奠定了基础。
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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