目的:研究TGF-β1促进Tenon囊成纤维细胞的增殖作用及核心蛋白多糖(Decorin)对TGF-β1促Tenon囊成纤维细胞增殖的抑制作用,探讨青光眼术后抗瘢痕的药物及其作用机理。
方法:(1)取新近发病的青光眼患者的Tenon囊组织,采用组织块贴壁培养法原代培养Tenon囊成纤维细胞,细胞经过冷冻与复苏后,观察细胞形态结构与生物学特性。(2)实验组加入不同浓度的TGF-β1(0.01、0.1、1、5、10 ng/ml),对照组不加TGF-β1,作用于Tenon囊成纤维细胞48h,MTT比色法检测Tenon囊成纤维细胞增殖。(3)实验组为5 ng/ml TGF-β1 和不同浓度Decorin(0.01、0.1、1、2、5µg/ml),对照组不加TGF-β1,作用于Tenon囊成纤维细胞48h,MTT比色法检测Tenon囊成纤维细胞增殖。
结果:(1)体外成功培养Tenon囊成纤维细胞,细胞生长活跃,形状稳定,细胞经过冷冻与复苏后,仍能保持其原来的细胞形态结构与稳定的生物学特性。(2)1ng/ml及以上浓度的TGF-β1能促进Tenon囊成纤维细胞的增殖,并与浓度成正比。(3)1µg/ml及以上浓度的Decorin能抑制TGF-β1促Tenon囊成纤维细胞增殖作用,其抑制作用与浓度成正比。
结论:(1)本实验用组织块贴壁法在体外成功培养了Tenon囊成纤维细胞,此方法操作简便,易于成功,为体外研究Tenon囊成纤维细胞相关实验建立良好的细胞模型。(2)TGF-β1可刺激Tenon囊成纤维细胞增殖,并与浓度有关,而文献报道青光眼滤过手术后滤过区组织TGF-β1水平增高,提示青光眼滤过手术后瘢痕形成可能与TGF-β1促Tenon囊成纤维细胞增殖有关。Decorin能抑制TGF-β1促进细胞增殖的作用,其机理可能通过Decorin与TGF-β1结合抑制青光眼滤过手术后瘢痕形成。
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