目的:
探讨纤连蛋白 Hep II功能域peptideV片段对体外培养的人眼小梁细胞的作用,以及其对大鼠眼压的影响。
方法:
1、在体外培养的人眼小梁细胞中加入纤连蛋白 Hep II片段,孵育10、18、24小时,通过光镜与电镜观察小梁细胞的形态学变化,同时通过免疫荧光染色观察纤连蛋白 Hep II片段对体外培养的人小梁细胞肌动蛋白、纽蛋白及β-连接素的影响。
2、通过点眼、结膜下注射及前房穿刺给予大鼠纤连蛋白 Hep II功能域peptideV片段,10、18、24小时后观察大鼠眼压的变化;点眼与结膜下注射后抽取大鼠前房水通过高压液相色谱分析检测前房水中短肽的浓度;透射电镜观察给予短肽后大鼠小梁组织超微结构的改变。
结果:
1、加入纤连蛋白 Hep II片段10-24小时,小梁细胞发生形态学的变化:细胞收缩、变圆,彼此间分离;同时观察到小梁细胞肌动蛋白、纽蛋白及β-连接素的表达下降;电镜下可见小梁细胞突起间缝隙增宽。
2、通过点眼、结膜下注射给予大鼠纤连蛋白 Hep II功能域peptideV片段后,大鼠眼压无明显变化;高压液相色谱分析未检测出前房水中有效的短肽浓度;前房穿刺给予大鼠纤连蛋白 Hep II功能域Peptide V片段后可以显著降低大鼠眼压达5.71+2.10mmHg,超微结构见小梁网细胞间区域增宽,细胞外基质减少。
结论:
1、纤连蛋白 Hep II片段能够降解人眼小梁细胞肌动蛋白及细胞连接;
2、前房穿刺给予大鼠纤连蛋白 Hep II功能域peptideV片段,可以明显降低大鼠眼压;
3、通过纤连蛋白Hep II功能域peptideV片段降解细胞骨架肌动蛋白及其细胞连接有可能成为一个重要的研究方向。
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