| 目的：观察PD102807对豚鼠离焦性近视的疗效，检测PD102807对离焦性近视豚鼠眼巩膜组织M4受体以及MMP-2/TIMP-2在mRNA和蛋白质表达水平的影响，探讨PD102807抑制近视的巩膜机制。方法：4周龄三色豚鼠32只，随机分为，Ⅰ正常对照组；Ⅱ单纯离焦组；Ⅲ 0.1N盐酸对照组；Ⅳ PD102807治疗组（2% PD102807溶解于0.1N盐酸溶液）。均以右眼为实验眼。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组豚鼠的右眼配戴-4D凹透镜片。药物对照组和PD102807组的实验眼分别隔日玻璃体腔内注射0.1N盐酸溶液和2%PD102807溶液。两周后检测4组动物右眼屈光度、眼轴长度。荧光定量PCR、RT-PCR、Western blot检测M4受体、以及MMP-2/TIMP-2在mRNA和蛋白质水平表达。结果：治疗两周后，PD102807治疗组和离焦组及盐酸组相比，眼屈光度分别增加2.06D±1.36D、1.00D±0.96D (P<0.01)。眼轴长度分别缩短了0.13mm±0.17mm、0.14mm±0.19mm，统计学分析无显著性差异(P>0.05)。PD102807治疗组与正常组相比，屈光度减少1.44D±1.70D，(P<0.05)；眼轴长度增加0.04 mm±0.10mm，统计学分析无显著性差异(P>0.05)。离焦组与正常组相比，各项指标差异显著(P<0.05)，与盐酸组比较各项指标无显著性差异(P>0.05)。探针法荧光定量PCR显示： PD102807组巩膜组织M4受体mRNA表达量分别为离焦组和盐酸组豚鼠眼的7.35倍和5.06倍；较正常组减少了25.45%；离焦组与正常组相比，M4受体mRNA表达量降低89.85%，与药物对照组无显著差异。Western blot显示：PD102807组M4受体蛋白表达较离焦组和盐酸组升高，而较正常组降低；离焦组M4受体蛋白表达量较正常组明显降低，与盐酸组无显著差异。RT-PCR显示：PD102807治疗组与离焦组和药物对照组相比，MMP-2的表达水平显著降低，TIMP-2水平明显升高；与正常组相比，MMP-2的表达水平升高，TIMP-2水平降低。离焦组与正常组相比，MMP-2 mRNA的表达显著升高，TIMP-2 mRNA表达水平明显降低，与盐酸组无显著性差异。Western blot印迹显示：PD102807组和离焦组及盐酸组相比，MMP-2蛋白表达水平显著下降，TIMP-2显著升高；和正常组相比，MMP-2表达水平升高，TIMP-2水平下降；离焦组与正常组相比，MMP-2的表达水平显著升高，TIMP-2的水平明显下降，与盐酸组无显著差异。结论：豚鼠离焦性近视形成过程中，M4受体数目下调，MMP-2/TIMP-2表达增高。巩膜组织M4受体可能参与豚鼠离焦性近视的形成；玻璃体腔注射M4受体拮抗剂PD102807能部分抑制豚鼠离焦性近视的发生发展，其作用机制可能为从转录水平增加M4受体表达，降低MMP-2/TIMP-2水平，促使细胞外基质合成积累增加，从而延缓近视的进展。 |
