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抗血管内皮生长因子小干扰RNA抑制大鼠角膜新生血管
作者:范先群  …  文章来源:上海交通大学医学院附属第九人民医院 200011  点击数868  更新时间:2006/6/25 23:31:07  文章录入:jackie_lin  责任编辑:毛进
目的 研究培养角膜上皮移植后角膜新生血管化(corneal neovascularization, CNV)和角膜组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)表达的变化特征,探讨针对VEGF的基因治疗的最佳时段;采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)联合培养角膜上皮移植治疗大鼠角膜碱烧伤,探讨该方法对角膜碱烧伤急性期CNV的抑制。 材料和方法 建立角膜碱烧伤CNV动物模型,对角膜碱烧伤CNV模型行培养角膜上皮移植,观察术后CNV程度,RT-PCR和免疫组化检测术后不同时段角膜组织VEGF的表达。设计和合成VEGF-siRNA,脂质体介导转染体外培养的以羊膜为载体的角膜上皮,采用VEGF-siRNA转染的培养角膜上皮移植联合前房注射脂质体包裹的VEGF-siRNA治疗CNV模型,观察该方法对碱烧伤急性期CNV的抑制效果。 结果 对角膜碱烧伤动物行培养角膜上皮移植后, 24h角膜组织VEGF mRNA的相对含量开始逐渐增高,72h达到高峰,之后逐渐下降;VEGF蛋白表达水平与移植时间呈正相关;采用VEGF-siRNA转染的角膜上皮移植联合前房注射脂质体包裹的VEGF-siRNA治疗后,实验组CNV面积显著小于对照组;其角膜组织VEGF表达水平各时段均显著低于对照组。 结论 培养角膜上皮移植后靶向VEGF的基因治疗,推测其最佳用药时段为移植后72h之内;VEGF-siRNA能显著抑制大鼠角膜碱烧伤急性期CNV形成。
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