【摘要】 目的 证实羊膜能够促进培养的角膜缘干细胞的增殖而抑制其分化。 方法 将传代培养的第3代角膜缘干细胞分别传代于盖玻片上和保存人羊膜上,然后进行免疫荧光染色及RT-PCR检测p63、 connexin43、keratin 3、 keratin 12的表达情况。 结果 免疫荧光染色结果示羊膜上细胞p63阳性率明显高于盖玻片上细胞,而connexin43的表达则相反。盖玻片上细胞可见较多明显的p63-connexin43双阳细胞,而羊膜上细胞基本没有此类双阳细胞,多为p63单阳细胞。盖玻片上细胞少数表达keratin 3,而羊膜上细胞则基本为keratin 3阴性。RT-PCR结果证实培养皿中传代培养的第4代角膜缘干细胞既有p63的高表达,也有keratin 12的低表达;而角膜上皮细胞只有keratin 12的表达,而无p63的表达。 结论 羊膜可促进培养的角膜缘干细胞的增殖并抑制分化,使其保持干细胞的特性;p63不是角膜缘干细胞的特异标志,而是干细胞和短暂扩充细胞的标志,p63+/connexin43-为干细胞,p63+/connexin43+则为短暂扩充细胞。
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