| 目的 调查5个LHON家系，采用PCR-SSCP和DNA测序，对三个家系的30个母系成员的血样进行了11个位点线粒体DNA(mtDNA)分子生物学检测，以了解LHON的临床和基因突变特点。方法 在三个家系中抽取母系成员的外周静脉血样30份作为实验组，抽取无视力障碍的正常人血样32份作为对照组。提取mtDNA, 4对引扩增出4个线粒体DNA片断，涵盖3394、3460、4136、4160、4216、11696、11778、14459、14482、14484、14498共11个突变位点。对扩增产物进行SSCP和DNA测序（DNA sequencing ）。参照剑桥标准mtDNA序列进行分析。 结果 5个家系的母系成员共78人（男36人，女42人），发病31人(39.74%)，男:女20∶11，平均发病年龄29.01岁。其中三个家系呈现遗传早发现象。用第一对引物P1、P2扩增340bp片段，其中含11778、11696两个位点。实验组30例SSCP检测结果全部为异常，对照组32例全部正常 。测序30个实验组样本均含有11778位点突变，对照组均无此位点的突变。实验组和对照组所有样本都出现11719位点的突变。第二对引物P3、P4扩增338bp片段，其中含14459、14482、14484、14498四个位点，SSCP检测发现仅一例LHON病人的结果有异常，对照组32人均未发现异常。SSCP异常的一个样品，多次测序均因为峰图紊乱而无法判读结果。第三对引物P5、P6扩增307bp片段，其中含3394、3460两个位点，实验组和对照组SSCP检测及测序均未发现异常。第四对引物P7、P8扩增327bp片段，含4136、4160、4216三个位点，实验组和对照组SSCP检测均未发现异常，测序中发现实验组一个样品携带4164位点A→G突变。结论 (1) LHON患者发病可能具有遗传早发现象。（2）11778点突变占所有母系成员。（3）4164位点突变是否是新的继发突变位点, 有待进一步研究。（4）与剑桥标准mtDNA序列比对，所有样本均出现11719位点突变，这可能是中国人存在的单核苷酸位点多态性。 |
