目的 研究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在体外培养的人角膜上皮细胞中的表达,观察外源性给予NGF对人角膜上皮细胞增殖情况的作用,进一步探讨NGF在角膜疾病治疗中的意义。
方法 采用刮片法进行人角膜上皮细胞培养,利用RT-PCR技术检测人角膜上皮细胞中NGF mRNA的表达;外源性给予NGF作用于第2-3代培养的人角膜上皮细胞,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定其对细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测角膜上皮细胞中细胞增殖核抗原的表达情况。
结果 本实验成功培养出人角膜上皮细胞,RT-PCR可在在培养人角膜上皮细胞中发现NGF mRNA的表达。加入外源性NGF后,培养人角膜上皮细胞的增殖率较对照组明显增加(P<0.01),流式细胞仪检测细胞增殖核抗原的表达也较对照组明显增多(P<0.01)。
结论 正常人角膜上皮细胞可以表达一定量的NGF mRNA,外源性给予NGF对体外培养的人角膜上皮细胞的细胞增殖有明显的促进作用。
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