| 目的：利用基因芯片技术筛选视黄酸（RA）培养人巩膜成纤维细胞（HSF）后相关基因群的表达变化，研究RA作用于HSF的相关通路，探讨近视眼发病的巩膜机制。方法：HSF传代至第四代后以1×106的密度接种于25cm2的培养瓶，以含10%FBS的DMEM/F12培养液培养24小时后，培养液转换为含浓度为1×10-5M RA的DMEM/F12，以未加RA组作正常对照，继续培养48后用Trizol一步法提取细胞中的总RNA，对样品RNA进行荧光标记，通过杂交与清洗，对标记的人类全基因组寡核苷酸芯片进行扫描，采用图像分析软件对芯片图像进行分析，把图像信号转化为数字信号，然后对芯片上的数据用Lowess方法进行归一化，最后以差异为两倍的标准来确定差异表达基因。结果：在用1×10－5RA培养HSF48小时后，人类全基因组寡核苷酸芯片的21571个基因共有562个基因表达有差异。其中运输36、转录调控30、信号60、逆境反应25、代谢133、发育67、细胞组织与生物发生15、细胞运动18、分化3、细胞周期25、细胞粘连31、细胞凋亡15个基因表达有差异。细胞外基质的富含亮氨酸的蛋白多糖分子均下调，细胞凋亡基因大部分上调，TGFβ通路基因大部分下调。结论：RA通过多条信号通路对HSF发生作用，RA在HSF的形态变化与功能维持中发挥了重要作用。关键词：视黄酸，人巩膜成纤维细胞，基因芯片 |
