| 目的 评价重组腺病毒Ad-EGFP转染眼前段组织的可行性和安全性。
方法 取Wistar大鼠，随机分为6组，每组15只。A组，角膜基质注射Ad-EGFP （滴度为1.785×108pfu/ml）15μl；B组，角膜基质注射生理盐水15μl；C组，前房注射 Ad-EGFP 20μl；D组，前房注射生理盐水20μl；E组，基质和前房各注射Ad-EGFP 10μl；F组，基质和前房各注射生理盐水10μl。裂隙灯观察眼前段变化。注射后2h、24h、72h、7d及14d取材，全眼球冰冻切片，HE染色；共聚焦显微镜观察GFP表达。
结果 （1）A,B,E,F组注射成功当时，角膜雾状水肿；24小时消退；5天恢复透明。C,D组角膜无水肿；24小时前房不同程度渗出，72小时消退。（2）各组均未见明显炎症细胞浸润和新生血管形成。（3） B,D,F组未见绿色荧光表达。A,C,E组注射2小时无阳性表达；24小时可见，7天达高峰，14天减弱。A组表达于角膜基质层(图1)，C组在角膜内皮层及虹膜前表面阳性表达(图2)；E组在角膜基质、内皮层以及虹膜前表面均有表达(图3)。
结论 Ad-EGFP可相对安全、高效地转染至大鼠眼前段组织。 |
