| 目的：评价重组腺相关病毒（recombinant adeno-associated virus，rAAV）载体介导碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF)基因对体外培养 虹膜色素上皮细胞（iris pigment epithelial，IPE）的转染及其表达，为视网膜色素变性的联合治疗奠定基础。方法：rAAV-bFGF转染体外培养的IPE细胞， ELISA法检测转染后bFGF基因的表达，MTT法和流式细胞仪检测IPE细胞表达的bFGF蛋白的生物活性。结果：IPE细胞培养上清液中检测到bFGF的表达：转染组为1.208ng/ml0.186ng/ml，未转染组为36.272pg/ml7.533pg/ml,P=0.000，MTT法显示bFGF基因表达产生的蛋白对体外培养的IPE细胞有促增殖作用，流式细胞仪检测IPE细胞周期中S期的百分比：加入转染组培养上清的实验组细胞S期占21.19%1.93%，加入未转染组培养上清的对照组细胞S期占16.47%2.37%，P=0.009. 结论：IPE细胞能高效的被rAAV载体转导，高水平分泌表达了具有生物活性的bFGF。这为基因治疗联合神经营养因子与虹膜色素上皮移植治疗视网膜色素变性提供了理论支持。 |
