| 目的 研究VEGF siRNA质粒转染人脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞后VEGF的表达及细胞增殖的情况，探讨VEGF siRNA抑制OCM-1细胞生长的意义。方法 体外培养人脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞。快速大量抽提VEGF siRNA表达质粒 p1.0CMV-VEGF siRNA，质粒经脂质体LipofectamineTM 2000转染OCM-1细胞，RT-PCR和ELISA检测转染后VEGF mRNA及VEGF蛋白被抑制的情况。MTT法检测p1.0CMV-VEGF siRNA转染OCM-1细胞后，细胞增殖和凋亡的情况。结果 p1.0CMV-VEGF siRNA质粒转染OCM-1细胞24小时后，其对OCM-1细胞内源性VEGF mRNA表达的抑制率约为54%，转染48小时、72小时后抑制率逐渐减弱。ELISA检测显示，转染24小时后VEGF 蛋白表达仅为空质粒对照组的47.2%。OCM-1细胞被VEGF siRNA转染后，MTT法示p1.0CMV-VEGF siRNA组细胞增殖较其他对照组受抑制。结论 采用RNA干扰技术，质粒p1.0CMV-VEGF siRNA经脂质体转染OCM-1细胞后，可以抑制VEGF mRNA和VEGF蛋白的表达，有望为CM治疗提供一种新方法。 |
