| 目的 探讨地塞米松(Dex)对体外培养的人眼小梁细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和缝隙连接蛋白Cx43表达和流畅阻力的影响。
方法 将体外培养的人眼小梁细胞选择第3-5代接种于0.4μm孔径的滤膜上,待细胞融合80%时加入含10- 7M Dex的DMEM-F12培养液继续培养，作为Dex处理组。细胞融合后1天、3天、5天、7天,应用内皮细胞电阻测量仪( EVOM)测定滤膜上单层小梁细胞电阻( TEER) ,评价其流畅阻力的变化;同时采用RT-PCR、Western-Blot检测小梁细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和缝隙连接蛋白Cx43的表达情况。
结果 细胞融合后1 天、3天、5天、7天时,对照组TEER分别为(36. 2 ±1. 7)Ω、(34. 0 ±1. 2)Ω、(35.6±1.6) Ω、(36.8±2. 5)Ω,而Dex处理组TEER则分别为(47. 4 ±2. 1)Ω、(61. 2 ±2. 9)Ω、(62.3±1. 4)Ω、(56.9 ±1.3)Ω,两组差异有统计学意义。Dex处理组小梁细胞ZO-1、Occludin和Cx43 mRNA和蛋白水平表达量较对照组增多,两组差异亦有统计学意义。
结论 经地塞米松处理后的滤膜上小梁细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和缝隙连接蛋白Cx43 mRNA和蛋白水平表达水平上调,小梁细胞TEER也升高,提示地塞米松上调紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和缝隙连接蛋白Cx43的表达水平可能与小梁细胞的流畅阻力改变有关。
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