【摘要】目的 探讨利用自体表皮干细胞重建角膜上皮的可能性。方法 1.体外部分:观察猴表皮干细胞在体外微环境诱导下,横向分化为角膜上皮细胞的情况,将分离培养的2~4代猴表皮干细胞与角膜缘基质组织及角膜上皮细胞进行共培养,分别于共培养前、后使用流式细胞仪、RT-PCR和免疫组织化学技术检测和鉴定分化情况;2.体内部分:观察联合体内微环境诱导,重建角膜上皮的效果,人羊膜为载体,将体外诱导的猴表皮干细胞移植到去上皮的自体角膜表面。结果 表皮干细胞在共培养前表达表皮干细胞标志,k15和整合素β1阳性,K1/K10和K3/K12阴性;共培养后k15和整合素β1阳性,K1/K10阴性,并表达K3/K12。自体眼表移植后8周,角膜透明、角膜荧光素染色阴性、无新生血管,上皮和基底膜结合紧密,与正常角膜有相似组织学结构,无结膜细胞侵入,AE5免疫组织化学染色阳性。结论 在适宜微环境下,表皮干细胞具有横向分化为角膜上皮细胞的潜能,利用自体表皮干细胞修复和重建角膜上皮层可行,预期将成为构建组织工程化类自体生物角膜的种子细胞。
*本课题受:国家高技术研究发展计划(2003AA205050);广东省科技计划项目(A302020101);国家科技攻关计划(3030901002005);教育部博士点基金(20030558074)基金的资助。
* 通讯作者:王智崇(中山大学中山眼科中心 510060 广州)
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