目的 临床研究发现,糖皮质激素对糖尿病性黄斑水肿有良好疗效,但是否与其抗炎作用有关尚不明确。本实验研究炎症相关性细胞因子在糖尿病大鼠视网膜的表达,及其与视网膜血管渗漏的关系,探讨糖尿病视网膜病变组织水肿发生的炎症机理。 材料与方法 1.腹腔注射streptozotocin 50mg/kg,诱导Wistar大鼠糖尿病模型。2. 视网膜组织免疫组化检查:糖尿病诱导后1、2、3月,眼内应用曲安奈德后2周、1月,分别做大鼠视网膜冰冻切片,免疫组化方法检测视网膜中肿瘤坏死因子(TNFa)、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子(ICAM)、环加氧酶2(COX-2)的表达。3. 视网膜血管通透性检查:糖尿病鼠、眼内应用糖皮质激素曲安奈德的大鼠,分别于上腔静脉注射1ml 2%Evans蓝溶液,视网膜铺片,观察Evans蓝在血管中的分布情况。4. 细胞在含IL-6(100mg/L)、IL-1(100mg/L)、前列腺素E2(100mg/L)的培养液中分别培养1天,RT-PCR方法检测视网膜血管内皮细胞紧密连接蛋白的表达。 结果 1. 腹腔注射streptozotocin能够成功诱导糖尿病大鼠模型。2.糖尿病诱导后40天,视网膜即存在TNFa、IL-1、IL-6、ICAM、COX-2的阳性表达,并持续到3月。糖皮质激素能够明显抑制上述细胞因子的表达。3.糖尿病诱导后3月,视网膜血管发生明显渗漏。眼内应用曲安奈德后,血管渗漏明显减轻。4.IL-1作用下,zo-1、zo-2、zo-3、claudin-2、occludin五种紧密连接蛋白的表达量均较正常明显下降。前列腺素E2作用下,zo-1、zo-3、claudin-2的表达明显下降。IL-6对紧密连接蛋白的表达无显著影响。 结论 糖尿病大鼠视网膜内存在COX-2、IL-1、IL-6、ICAM、TNF等炎症相关性细胞因子的表达,并能够诱导视网膜血管渗漏。细胞因子表达可能是糖尿病性黄斑水肿的一种发病机制。
|