目的 筛选视觉可塑性关键期终止相关基因,探讨视觉可塑性关键期终止的分子机制。方法 采用暗饲养60天后加光照刺激7天大鼠模型及暗饲养67天大鼠模型,应用抑制性消减杂交技术构建大鼠视皮层与视觉可塑性关键期终止相关的cDNA文库。通过巢式PCR及反向Northern杂交对构建的cDNA文库进行筛选及验证,并对部分阳性克隆进行了测序及同源性分析,筛选视觉可塑性关键期终止相关基因。结果 成功构建了高消减效率的大鼠视皮层与视觉可塑性关键期终止相关的cDNA文库,经筛选、测序及同源性分析,得到14个视觉可塑性关键期终止时视皮层上调表达基因的片段。其中13个为已知基因,一个为新基因片断。已知基因中除β-Tubulin、Mbp、Cyclophilin基因有文献报道跟可塑性有关外,其余基因与视觉可塑性的关系以往未见报道。结论 通过大鼠视皮层与视觉可塑性关键期终止相关的cDNA文库的建立,筛选出一批与视觉可塑性关键期终止相关的候选基因,为进一步阐明视觉可塑性关键期终止的分子机制提供了重要的基础。 |