目的 研究腺苷(Adeonosine)对嘌呤受体P2X7和谷氨酸受体NMDA激活诱导的大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)死亡的神经保护作用。方法(1)对新生Long-Evan大鼠进行上丘注射荧光标记物Aminostilbamidine以标记RGCs,检测P2X7激动剂BzATP(50µmol/L)、谷氨酸受体激动剂NMDA(N-甲基-D-天冬氨酸,100µmol/L)和腺苷(300µmol/L)对体外培养RGCs存活率的影响;(2)体外培养未经Aminostilbamidine标记的新生大鼠RGCs,以10 µmol/L 钙离子(Ca2+)荧光染料Fura-2标记后,利用Ca2+影像测定仪分别测定BzATP、NMDA和腺苷对RGCs胞内Ca2+浓度的影响。结果 BzATP和NMDA均引起体外培养的RGCs死亡,BzATP在50 µmol/L、NMDA在100 µmol/L 浓度下,均约杀死30%的RGCs。而300 µmol/L 腺苷则可明显减轻两者对RGCs的毒性作用,使RGCs 存活率分别从68.9%± 2.3%、69.9%± 3.2%提高至91.2% ± 3.5%(p <0.001)、102.1% ± 3.9%(p <0.001)。BzATP可引起RGCs 胞内Ca2+持续升高,在50 µmol/L浓度下可使胞内Ca2+升高至(1183 ± 109)nmol/L。在300µmol/L腺苷作用下,BzATP介导的Ca2+升高幅度显著降低,仅升高为(314 ± 64)nmol/L(p<0.001)。结论 腺苷能阻止P2X7受体和NMDA受体激活诱导的RGCs死亡和胞内钙离子浓度升高,具有神经保护作用。
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30471850);广东省自然科学基金资助项目(04009334);教育部回国人员科研启动基金资助项目(教外司留[2005]55号);广州市科技计划项目(2006) |