| [摘 要] 目的：观察caspase-9在RCS大鼠视网膜的时空表达及其抑制剂对大鼠感光细胞凋亡的影响，探讨caspase-9及其抑制剂在感光细胞凋亡和凋亡保护中的作用。方法：44只健康RCS大鼠分两大组：第一大组12只再随机分4组，15、20、25、30 d各3只；第二大组全部18d，随机分4小组共32只，分别在20、25、30、35 d时被处死。第一组实验及其对照大鼠在检查ERG后处死取视网膜行caspase-9的免疫组化、荧光活力分析、Western blot及凋亡TUNEL检测。第二组先随机抽8只行单眼ERG检查，之后立即单眼玻璃体内注射Z-LEHD- FMK 4μg，对照眼注等量2%DMSO。注药后在上述相应处死时间点检查双眼ERG后摘除双眼球，行H-E染色及TUNEL检测，透射电镜观察视网膜超微结构。结果：第一组RCS大鼠在25d ERG接近熄灭型。TUNEL阳性细胞只在RCS大鼠外颗粒层表达，25d最明显。25d后RCS大鼠感光细胞内节可见明显caspase-9阳性表达，20d caspase-9表现出最大活力(10.98±0.13)ρmol/mg/min。Western blot分析显示caspase-9裂解条带在20d时最明显。第二组注入Z-LEHD-FMK后，25d时实验眼ERG 的b波振幅达最大( 137.35±7.41 )mV，35d时仍能检测到，而对照眼25d及以后各组ERG接近熄灭型。实验眼35d时外颗粒层强荧光的凋亡阳性细胞才更明显，对照眼则在25d已很明显并持续到35d。光镜下30d实验眼外颗粒层细胞数7～8层，视网膜无明显变薄，对照眼2～4层，整个视网膜变薄。透射电镜下25d对照眼部分感光细胞胞核核仁固缩；17d实验眼及对照眼均见较多的感光细胞呈现凋亡改变。结论：caspase-9在感光细胞凋亡调控中发挥重要作用，Z-LEHD-FMK在适宜的时机应用能够延缓RCS大鼠感光细胞凋亡。
本研究接受国家自然科学基金(No. 30200307)及广东省医学科技基金资助(No. B2002045)
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