目的 探讨不同诱导分化条件对恒河猴骨髓间充质干细胞(bone mesenchvmal stem cells.BMSCs)的体外增殖和特异性诱导分化为神经元样细胞的能力差异。方法 分别采用3种不同的诱导方法体外定向诱导第三至五代的BMSCs向神经元样细胞分化,应用相差显微镜观察神经元样细胞和免疫细胞组化检测神经元样细胞所表达的神经元特异性标志神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase.NSE)和神经丝蛋白(neurofilament .NF ),及星形胶质细胞特异性标志胶质纤维酸性蛋白(glia fiber acid protein.GFAP),井进行神经元样细胞定量分析。结果 所采用的3种定向诱导方法都能使MSCs特异性诱导分化为神经元样细胞,经过定量计数分析发现用上述方法处理BMSCs后,神经发育关键因子音猬因子诱导方案组诱导分化为神经元样细胞的能力为最强,出现NSE阳性的细胞约为75. 5%士3.5,出现NF阳性的细胞约为77.2%士2..8,较经典RA方案具有统计学差异。结论 音猬因子能够高效率定向诱导恒河猴BMSCs分化为神经元样细胞。
本课题受:国家自然科学基金 (30500555) ,广东省自然科学基金 (5300664)的资助。
通讯作者:葛坚, jiange@gzsums.edu.cn |