目的:利用重组腺病毒携带CNTF基因对高眼压大鼠神经节细胞的保护作用,探讨CNTF基因修饰节细胞应用于青光眼治疗的可能性。方法:利用基因重组原理,构建可表达CNTF的腺病毒;利用二极管激光透巩膜烧灼小梁网60-80点及3-5条上巩膜静脉5个点,造成慢性高眼压模型;玻璃体内注射重组腺病毒或生理盐水,应用笔式眼压计测量眼压;在3 14 35处死大鼠取视网膜组织,处死前行P-ERG检查;美蓝染色光镜下观察节细胞形态改变并作细胞记数分析;ABC免疫组化、RT-PCR观察CNTF表达;测量视网膜内核层及内网层外缘至内界膜的厚度。结果: 眼内注射腺病毒后CNTF均得到了显著表达,从3 d、14d 直至均高效表达,与正常对照组、高眼压组、生理盐水相比其差异均有显著性。35d后波波幅AV-CNTF组为正常90.28%,而高眼压组为正常66.12%(P<0.05)。视网膜高眼压后厚度小于正常对照组;节细胞数目减少,部分节细胞呈现坏死特征;Ad-CNTF处理后视网膜有明显改善,与实验对照组比较节细胞存活数增加,厚度大于实验对照组。结论:含目的基因CNTF的腺病毒,并能在视网膜中持续表达。大鼠慢性高眼压可导致视网膜节细胞凋亡,而AV-CNTF可有效促进慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞的存活。 |