| 目的 增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是临床上常见的难治性致盲性眼病之一，其发病机理和防治尚有许多未明之处。PVR是一种炎性应答反应，在这个过程中有刺激活化的细胞和细胞外基质(ECM)的分解和产生，并伴随着活化细胞蛋白水解酶的释放，其中基质金属蛋白酶(MMPs)是调节ECM动态平衡的最重要的一大酶系。MMPs与组织型基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)一起形成精确的平衡，控制组织的降解。该实验的目的在于观察MMP-2,MMP-9和TIMP-1,TIMP-2在PVR增生膜的表达，及炎性因子作用下在培养人视网膜色素上皮(RPE)细胞的表达。方法 用免疫组织化学方法检测MMP-2,9和TIMP-1,2在PVR增生膜的表达，用酶谱分析法检测IL-1β和TNF-α作用下hRPE细胞MMP-2,9的活性，RT-PCR法检测hRPE细胞MMP-2,9和TIMP-1,2的mRNA水平，以及分别联合IL-1rA、genistein和地塞米松作用后上述指标的变化情况。 结果 31例增生膜中22(71%)例表达MMP-2，7(23%)例表达MMP-9阳性，14(45%)例表达TIMP-1阳性，9(29%)例表达TIMP-2阳性，统计学分析与PVR分级之间没有明显相关性(P>0.05)。IL-1β和TNF-α分别联合100μg•L-1IL-1rA、100μMgenistein、100mg•L-1地塞米松，活性MMP-2表达量下降，分别为未刺激组的112%和174%、87%和75%、43%和60%；活性MMP-9的表达量下降，为未刺激组的113%和168%、0%和0%、0%和0%。RT-PCR检测hRPEmRNA水平，结果显示：正常hRPE有MMP-2,MMP-9和TIMP-1,TIMP-2 mRNA表达。IL-1β和TNF-α明显上调MMP-2,MMP-9mRNA水平，轻度上调TIMP-1 mRNA水平。MMP-2/β-actin mRNA比值分别为(140.5±12.6)%和(116.7±6.2)%；MMP-9/β-actin mRNA比值分别为(85.7±9.6)%和(96.3±9.2)%，TIMP-1/β-actin mRNA比值分别为(95.8±10.2)%和(92.3±9.7)%。联合使用IL-1rA、genistein和地塞米松后，下调IL-1β和TNF-α刺激的MMP-2,MMP-9和TIMP-1 mRNA水平升高。加用100μMgenistein和100mg•L-1地塞米松后，MMP-2/β-actin的mRNA比值分别为 (29.7±4.5)%和(32.8±5.0)%，(30±5.1)%和(24.2±3.6)%；MMP-9/β-actin的mRNA比值分别为(15.3±3.1)%和(17.6±3.3)%，(13.4±3.2)%和(15.9±3.5)%；TIMP-1/β-actin的mRNA比值分别为(60.4±7.2)%和(61.1±7.5)%，(51.2±5.8)%和(47.8±5.2)%。TIMP-2mRNA水平无明显变化。结论 增生膜中MMP-2和TIMP-1表达阳性比率高，而MMP-9 和TIMP-2表达比率较低。MMP-2,9主要在早期膜表达，TIMP-1,2的主要在晚期膜表达。 IL-1β和TNF-α 上调了培养hRPE细胞的活性MMP-2和MMP-9的表达。IL-1rA, genistein和地塞米松则对这种诱导有抑制作用；IL-1β和TNF-α 明显上调了MMP-2和MMP-9 mRNA水平，TIMP-1mRNA水平轻度升高，TIMP-2mRNA水平无明显变化；IL-1rA，genistein和地塞米松对这种上调有抑制作用。 |
