目的:探讨内质网Ca2+-ATPase选择性抑制剂Thapsigargin(TG)对HLE-B3细胞膜上Ca2+ATPase同工异构体PMCA1表达的调控。
方法:培养的HLE-B3细胞达到90%融合后,用浓度为0μM、0.01μM、0.1M、1μM和10μM的Thapsigargin分别处理4、12、16、24小时,然后分别抽取总mRNA,用real time RT-PCR的方法对细胞膜上Ca2+ATPase同工异构体PMCA1表达的进行定量检测。
结果:HLE-B3细胞0μM、0.01μM、0.1M、1μM和10μM的处理4、12、16、24小时后,发现在TG低浓度时(0μM、0.01μM、0.1M),随着TG浓度的升高,PMCA1mRNA的表达随之升高;而当TG浓度过高时(大于1μM),PMCA1mRNA的表达反而下降。
结论:在TG低浓度时,随着TG浓度的升高,Ca2+浓度升高,PMCA1mRNA的表达随之升高;而当TG浓度过高时,可能由于TG的毒性作用,PMCA1mRNA的表达反而下降。TG对PMCA1的调控作用主要在于它能升高胞浆的Ca2+浓度,有关研究有望对后发障防治提供新的途径。 |