目的:视网膜色素上皮细胞(RPE)是参与PVR病变的主要细胞,研究PVR病变中RPE与生物因素关系的实验多使用离体的标本或培养RPE,但是这些方法往往与视网膜脱离发生和损伤修复时RPE的实际状态相差较远,因为无论是细胞因子还是RPE在不同生物学状态时,所发挥和表现的特点是不同的,所以应当进一步建立能够与临床相近的RPE损伤模型来观察各种生物学因素对其的影响。
方法:1、体外培养人RPE细胞,选用3—8代,每次使用附壁时间相同的细胞用于实验。2、磁珠(Fe3O4)与胶原质溶液共孵育,包被磁珠。免疫组化染色检测磁珠的包被效果。3、磁珠悬液加入培养人RPE细胞后孵育培养,洗去未结合磁珠,扫描电镜观察结合率并照相。4、将细胞置于磁场下培养,12小时后检测细胞膜流动性和细胞骨架的变化。
结果:1、包被胶原后的磁珠经免疫组化染色呈阳性,未包被胶原的磁珠无着色。2、扫描电镜观察到磁珠散在的呈点状和团块状分布于细胞表面,经胶原质溶液预处理的细胞与磁珠的结合率明显低于未处理组(P<0.01)。3、受力牵拉组细胞流动性变化明显(P<0.05),组间细胞骨架的变化不明显(P>0.05)。
结论:应用细胞生物力学的模型,模拟视网膜脱离发生时RPE的实际状态,以细胞学实验动态地模拟实际的临床病理变化,使今后的基础实验更加贴近于临床,使实验结果更加可靠和有实际意义,对认识眼内细胞增生的病理变化,为临床治疗眼内细胞增生性疾病提供有力的实验支持。
|