| 目的：探索恒河猴皮肤干细胞的体外培养及纯化条件，为进一步的研究奠定基础。
方法：通过组织块培养法和消化培养法在体外培养恒河猴表皮细胞，然后用IV型胶原吸附法吸附20分钟，获得快吸附细胞，对快吸附细胞进行克隆培养，并进行免疫组化双标、RT－PCR鉴定β1整合素和角蛋白15的表达，用流式细胞仪鉴定纯化前后的细胞中β1整合素和角蛋白15的阳性细胞比例，并通过透射电镜观察细胞的超微结构。
结果：组织块培养法和消化培养法均可获得表皮细胞，IV型胶原纯化后的细胞胞体较小，饱满，核/浆比例大，细胞镶嵌状排列。细胞克隆分析显示细胞全克隆生长率高，细胞免疫荧光显示分选后的细胞显示β1整合素和角蛋白15阳性，RT－PCR检查呈现β1整合素和角蛋白15的特异性片断，流式细胞仪检查显示纯化前的细胞中角蛋白15阳性细胞占总细胞中的比例为8％，β1整合素阳性细胞的比例为10.7％；纯化后，角蛋白15阳性细胞的比例为89.4％，β1整合素阳性细胞的比例为88.5％。
结论：通过组织块培养法和消化培养法均可培养获得活性良好的表皮细胞，IV型胶原吸附法是一种简便、有效的皮肤干细胞分离方法，可以为进一步的眼表上皮替代重建眼表提供足量的高纯度的干细胞。
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