| 目的
研究表明，血-视网膜屏障（Blood-Retina Barrier, BRB）破坏是糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy，DR）最早期病理改变之一，尽管其确切的发病机制不明，但越来越多的资料显示早期视网膜血管的损害与炎症/免疫因素密切相关。本研究探讨免疫抑制剂FK506对大鼠早期糖尿病血-视网膜屏障的保护作用，为糖尿病视网膜病变的防治开辟一条新途径。
方法
成年雄性Wistar大鼠，STZ腹腔注射诱导糖尿病，取成模后8天大鼠选其中一眼玻璃体腔注射FK506 2.5ng，另一眼注射等量的稀释10000倍80%乙醇（药物溶剂）。手术后24小时取材进行以下检测：
1. 45mg/kg的剂量行伊凡思蓝静脉注射，2h后PBS灌注并摘除眼球取视网膜，置于甲酰胺中浸泡提取染料，用分光光度计测量甲酰胺中染料的浓度。
2. 应用免疫荧光技术检测视网膜铺片Occludin的表达改变，评价血-视网膜屏障的改变。
3. 术后24h摘除眼球取视网膜，制备组织匀浆，提取总蛋白。经Western blot方法半定量分析视网膜内VEGF和ICAM-1的含量。
4. 取眼球行冰冻切片，每一载玻片中收三片冰冻切片，每切片相隔300μm，TUNEL法检测视网膜细胞凋亡情况，对每一切片阳性细胞进行计数，应用SPSS统计软件进行统计分析。
结果
1. 玻璃体腔注射FK506可以部分改善BRB的破坏，可降低伊凡思蓝—白蛋白渗漏49.01%, P<0.05。
2. 糖尿病大鼠FK506注射眼毛细血管及动脉中Occludin表达呈梭形网状排列，排列紊乱、中断，在胞浆内即网眼中可伴点状染色，空白对照眼毛细血管及动脉中荧光强度较弱，网眼的排列更为紊乱，中断现象严重。
3. 玻璃体腔注射FK506可以抑制糖尿病大鼠视网膜内VEGF的表达，对VEGF表达的抑制率达82.17%，P<0.001。并可抑制糖尿病大鼠视网膜内ICAM-1的表达，抑制率达74.27%( P<0.01)。
4. 糖尿病大鼠对照眼视网膜节细胞层见少量的凋亡细胞，9.2±3.4个/切片，FK506注射眼未发现凋亡细胞，两组比较有显著性差异。
结论
FK506玻璃体腔注射对糖尿病大鼠血-视网膜屏障具有保护作用，其作用机理可能是抑制VEGF及ICAM-1表达，增加Occludin的表达，并维持其正常分布。且可能对糖尿病引起的视网膜神经细胞的凋亡有保护作用。
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