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RNA干扰Foxe3对人永生化晶状体上皮细胞增殖的影响
作者:黄钰森  …  文章来源:山东省眼科研究所  点击数1412  更新时间:2006/7/7 10:04:22  文章录入:aya610  责任编辑:毛进
目的: 研究靶向Foxe3基因的siRNA对Foxe3基因的特异性下调作用及其对晶状体上皮细胞增殖的影响。方法: 采用小分子RNA干扰(RNAi)技术,以阳离子脂质体为载体,将针对人Foxe3基因生物合成的发夹状短链RNA(Foxe3-shRNA)转染人永生化晶状体上皮细胞(HLEC-B3),抑制Foxe3的表达;采用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)、荧光定量PCR(Real-time PCR)和Western blot免疫荧光检验shRNA干扰Foxe3表达的效果;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)和细胞生长曲线法检测细胞的生长状况;采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果: RNAi技术可有效封闭HLEC-B3细胞中Foxe3 mRNA和蛋白的表达;细胞增殖明显受到抑制,细胞周期被阻滞于G0/G1期,并可诱导细胞凋亡峰。 结论: Foxe3-shRNA可特异性抑制Foxe3基因的表达,并抑制晶状体上皮细胞生长和增殖。
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