目的 :通过半导体激光光凝诱导C57BL/6J小鼠产生CNV,将常规眼底荧光造影仪加以改进,对小鼠进行眼底荧光造影,监测CNV发展过程。
方法:将C57BL/6J小鼠腹腔联合注射盐酸氯氨酮和盐酸氯丙嗪麻醉。散瞳后即可进行CNV半导体激光诱导或眼底血管荧光造影。实验眼经裂隙灯用532 nm激光(功率100 mW,光斑直径75 μm,曝光时间100 ms)围绕视盘1~1.5 PD等距离光凝,光凝时有气泡产生标志击破Bruch膜,每眼做4个有效光凝点,均匀分别于各象限。将+20D间接镜用胶带粘于眼底照相机镜头前,小鼠腹腔注射2%荧光素钠25 μl(2 mg/kg),注射荧光素钠时即开动计时器计时,观察眼底并连续拍片,记录荧光造影全过程。
结果:正常鼠眼底荧光造影结果:小鼠腹腔注入荧光素钠后当视乳头上视网膜中央动脉出现荧光时,即为视网膜循环开始。腹腔注入荧光素钠后约45秒动脉血管开始显荧光(图1,A),动脉血管充盈(图1,B),1分钟左右随着视网膜血流荧光素钠到达毛细血管网(图1,C)。造影观察时间>15分钟。
CNV模型鼠眼底荧光造影结果:血管造影早期即可见到激光光凝区呈细网状高荧光(图2,A),造影过程中荧光强度增强,范围扩大(图2,B),部分高荧光片融合,呈大的高荧光团(图2,C)。
结论 :本实验所行的小鼠荧光造影能够满足实验性CNV的判断及评价,更好的于活体观察CNV的自然发展过程,为进一步研究CNV机制提供支持。
图1. 正常鼠眼底血管荧光造影:A荧光素钠腹腔注入后45秒动脉血管显影,B动脉血管充盈明显,C荧光素钠注入后约1分钟随视网膜血流荧光素钠到达毛细血管网
图2. CNV模型鼠眼底血管荧光造影:A血管造影早期即可见到激光光凝区呈细网状高荧光,B造影过程中荧光强度增强、范围扩大,C部分高荧光片融合,呈大的高荧光团
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