目的:研究烟草中的重要成分尼古丁对体外培养的视网膜色素上皮细胞(RPE细胞)的形态、功能以及基因表达的影响,为揭示吸烟在年龄相关性黄斑变性发生发展中的作用机制提供依据。
方法:体外培养来自胚胎的RPE细胞,经HA滤膜培养体系培养为极性单层后分别用1、5、25μm不同浓度的尼古丁处理,定时记录细胞跨上皮电阻(TER),动态观察其对RPE细胞电阻率的影响;RT-PCR测定尼古丁处理72h后RPE细胞不同基因(包括补体因子CFH、炎性因子IL-6、趋化因子IL-8)表达量的变化;扫描电镜观察尼古丁对RPE细胞形态的影响。
结果:经不同浓度尼古丁处理后,RPE细胞电阻率均呈下降趋势,经1、5、25μm尼古丁处理2月后的细胞TER分别由起始的38.69、46.55、46.15下降为10.06、7.53、1.6。RT-PCR结果显示尼古丁处理后RPE细胞CFH的表达量增加,而IL-6、IL-8的表达量减少,且与对照相比都有显著性差异(P均<0.05)。扫描电镜结果显示RPE细胞经尼古丁处理后细胞形态趋于不规则,细胞间连接也变得不紧密。
结论:尼古丁可以改变RPE细胞的正常形态,破坏细胞正常的屏障功能,影响细胞的基因表达,提示尼古丁可能通过改变RPE细胞正常的形态、生理功能来参与调控年龄相关性黄斑变性的早期发病进程。
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