| 目的 比较角膜组织脱细胞的两种新方法，探讨以去细胞角膜基质为支架构建组织工程化角膜上皮和移植的可行性。 方法 分别用NaCl-SDS-胰蛋白酶和Dispase-Triton-X-100处理兔角膜组织，用裂隙灯显微镜、透射电镜和组织病理学方法观察经两种方法处理后，角膜基质的特性和脱细胞效果。取兔角巩膜缘上皮组织接种于脱细胞（Dispase-Triton-X-100）的猪角膜前弹力层/基质上，体外重建兔角膜上皮细胞层，并进行形态学、组织病理学和免疫组织化学检测。将构建的组织工程化雄兔角膜上皮组织，板层移植于雌兔受体角膜上，裂隙灯观察，组织病理学和PCR检测。 结果 两种方法处理过的兔角膜基质大体形态相似，灰白色不透明，水肿明显，质地柔软。组织病理学和超微形态学检查结果显示两种方法处理的兔角膜基质胶原排列规整，但是NaCl-SDS-胰蛋白酶处理的角膜组织残留了部分基质细胞及细胞碎片，而Dispase-Triton-X-100处理的角膜组织未见基质细胞及细胞碎片。兔角膜缘上皮组织块接种于脱细胞猪角膜前弹力层/基质上，24h后角膜上皮细胞开始游出，3~4d开始融合，7~8d形成单细胞层。免疫组化检测组织工程化角膜上皮细胞表达特异性角蛋白CK3。组织工程化角膜上皮作异体移植后，10-15d变为透明，1月时可见许多基质细胞长入脱细胞角膜基质，基质纤维排列规则，上皮细胞呈复层结构。 结论 Dispase-Triton-X-100是一种良好的角膜脱细胞方法。以脱细胞猪角膜前弹力层/基质为支架，可在体外构建组织工程化兔角膜上皮组织。组织工程化角膜上皮移植后可在受体角膜上存活生长，并保持角膜上皮层的复层形态结构。
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