目的 研究角膜新生血管周围间质微环境与新生血管生长之间的关系,进一步探讨角膜新生血管的发生机制。方法 40只Wister大鼠,按照随机数字法取36只,采用NaoH滤纸烧片灼法制作碱烧伤角膜新生血管模型。术后7天免疫荧光法检测角膜新生血管周围间质转化生长因子-β1(TGF-β1)、a-平滑肌肌动蛋白 (a-SMA)、成纤维细胞激活蛋白(FAP)的表达情况,并观察它们与新生血管之间的关系。采用RT-PCR方法检测术后3天、7天FAP在角膜中不同位置的表达。苦味酸天狼猩红—偏振光法检测术后7天角膜间质中主要胶原I型和III型胶原的改变。透射电镜观察术后7天角膜新生血管形成时,间质的改变。结果 碱烧伤后7天角膜冰冻切片免疫荧光双染显示:角膜间质TGF-ß1阳性表达,角膜内均含有a-SMA、FAP同时阳性的细胞,对照正常角膜无阳性表达。FAP+基质细胞位于CD31+的血管内皮细胞周围,与血管内皮细胞伴行生长,两者无明显的先后顺序。RT-PCR结果显示,新生血管生长到达的位置,出现FAP阳性表达。角膜新生血管生长后间质中I 型、III型胶原重新排列。透射电子显微镜下,血管内皮细胞周围被另外一种细胞包绕。 结论 角膜新生血管形成时,血管周围间质微环境发生了一系列改变,出现了 FAP+的基质细胞,此细胞包绕并伴随血管内皮细胞生长;间质中I 型、III型胶原重新排列以适应新生血管的生长。
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