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色素上皮衍生因子在体外培养成人眼IPE与RPE细胞表达研究
作者:严翔  张…  文章来源:复旦大学附属眼耳鼻喉科医院 200031  点击数1257  更新时间:2004/5/28  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的:测定并比较色素上皮衍生因子(PEDF)在成人眼IPE与RPE细胞的表达情况。方法:以酶辅助显微分离-酶消化法分离IPE细胞并培养,以酶消化法分离RPE细胞并培养,Trizol法提取生长融合传二代细胞总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞PEDF mRNA的表达。并将第二代细胞以5×104 /ml密度接种于六孔板,7天后换以不含FBS的F-12培养液,分别于1、2、3、4天后收集细胞上清液,以酶联免疫吸附实验(ELISA)测定两种培养细胞上清液中PEDF含量。结果:体外培养的成人眼IPE与RPE细胞均表达PEDF mRNA,IPE细胞PEDF mRNA表达低于RPE细胞,其表达量约为RPE细胞的77.5%。IPE细胞上清液中PEDF含量也明显低于RPE细胞,差异有统计学意义(p<0.01)。结论:体外培养的成人眼IPE与RPE细胞均能表达PEDF,但无论在RNA水平还是蛋白水平,IPE细胞中PEDF表达均较RPE细胞低。
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