目的:测定并比较色素上皮衍生因子(PEDF)在成人眼IPE与RPE细胞的表达情况。方法:以酶辅助显微分离-酶消化法分离IPE细胞并培养,以酶消化法分离RPE细胞并培养,Trizol法提取生长融合传二代细胞总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞PEDF mRNA的表达。并将第二代细胞以5×104 /ml密度接种于六孔板,7天后换以不含FBS的F-12培养液,分别于1、2、3、4天后收集细胞上清液,以酶联免疫吸附实验(ELISA)测定两种培养细胞上清液中PEDF含量。结果:体外培养的成人眼IPE与RPE细胞均表达PEDF mRNA,IPE细胞PEDF mRNA表达低于RPE细胞,其表达量约为RPE细胞的77.5%。IPE细胞上清液中PEDF含量也明显低于RPE细胞,差异有统计学意义(p<0.01)。结论:体外培养的成人眼IPE与RPE细胞均能表达PEDF,但无论在RNA水平还是蛋白水平,IPE细胞中PEDF表达均较RPE细胞低。 |