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银杏叶提取物保护视网膜神经细胞的作用机制研究 |
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作者:马科,王宁… 文章来源:首都医科大学附属北京同仁医院 点击数1759 更新时间:2006/7/9 18:03:12 文章录入:cdmake 责任编辑:毛进 |
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取人视网膜制成3×106个/ml细胞悬液,用IMDM培养液CO2培养箱中培养,培养10天时90%为NSE阳性的神经细胞,用该细胞进行实验。
EGb761 对线粒体膜电位(MMP)的影响:取上述培养的细胞,加入0.1%Rhodamine123 2μl,置37℃5%的CO2 培养箱孵育30分钟,激光共聚焦扫描显微检测,向不同的皿中分别加入1mM谷氨酸,及lmM 谷氨酸 + 0.3%EGb761。谷氨酸组15例膜电位由54.33±9.29变为27.57±10.46。谷氨酸(先) + EGb761(后)组15例,膜电位由27.81±9.84变为35.59±9.98,加入前后有显著性差异(P<0.05)。
EGb761 对细胞内游离钙的影响:用同样的方法,染色剂为Fluo-3,谷氨酸组16例,细胞内游离钙由51.56±10.23增加至95.58±18.43,有高度显著性差异(P<0.01)。谷氨酸(先)+EGb761 (后)组16例,细胞内游离钙由97.63±12.36变为87.12±11.20,有显著性差异(P<0.05)。
EGb761对视网膜细胞凋亡的影响:培养24小时的人视网膜细胞经Annex Ⅴ和PI双重染色,用流式细胞仪检测。对照组视网膜细胞存活率为40.68%,谷氨酸组为32.45%,EGb761组为44.29%,EGb761+谷氨酸组为38.85%。谷氨酸与对照组相比,视网膜细胞存活率明显降低,有高度显著性差异(P<0.01)。EGb761组与对照组相比,视网膜细胞存活率明显升高,有高度显著性差异(P<0.01),表明EGb761对视网膜神经细胞凋亡有明显抑制作用。
EGb761通过抑制谷氨酸导致的MMP下降,抑制谷氨酸导致的细胞内游离钙增加,抑制视网膜神经细胞的凋亡,来发挥保护视网膜神经细胞作用的。
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