[摘要] 目的 利用构建成功的重组真核表达质粒pcDNA-gB及截短pcDNA-gBt免疫小鼠,探讨HSV-1 gB基因作为基因疫苗的可能性。方法 用重组真核表达质粒pcDNA-gB及截短pcDNA-gBt分别、联合免疫小鼠,通过中和试验、ELISA方法、及流式细胞仪检测pcDNA-gB及截短pcDNA-gBt接种小鼠的免疫效果,并对免疫的小鼠进行病毒攻击。结果 实验小鼠产生了对HSV-1特异性的抗体(pcDNA-gB组 ELISA法1:273,中和试验法:1:49;pcDNA-gBt组ELISA法1:245,中和试验法:1:41 pcDNA-gB及pcDNA-gBt组 ELISA法1:275,中和试验法:1:57), 实验组中和效价显著高于载体对照组和阴性对照组(p<0.01);对病毒的攻击并有免疫保护作用,实验组和阴性组比较(P<0.01)结论 证明pcDNA-gB及截短pcDNA-gBt真核表达质粒,具有DNA疫苗作用,可在小鼠体内诱发保护性免疫反应,且pcDNA-gB以体液免疫为主,pcDNA-gBt以细胞免疫为主,二者联合免疫优于单纯一种疫苗的免疫效果; pcDNA-gB有可能作为基因疫苗用于单纯疱疹病毒性角膜炎预防和治疗,为进一步构建单纯疱疹病毒糖蛋白联合疫苗并最终用于单疱病毒眼病奠定了理论基础。 |