目的:观测Rac1-siRNA基因表达载体对大鼠视网膜新生血管模型中新生血管生成相关因子表达的抑制作用。
方法:采用50只成年SD大鼠,采用光动力法诱导视网膜新生血管动物模型后,玻璃体腔转染Rac1-siRNA载体作为基因干预组;另眼注射空白载体作为空白对照组;同时采用正常同龄大鼠25只单眼玻璃体腔内注射Rac1-siRNA载体作为空白干预组。免疫组织化学法从蛋白水平检测各组大鼠视网膜内新生血管生成相关因子:Rac1、VEGF、HIF-1α和NF-κB的表达情况。检测平均光密度值,进行统计学分析。提取各组大鼠视网膜总RNA,应用RT-PCR方法检测视网膜中新生血管生成相关因子:Rac1、VEGF、HIF-1α和NF-κB的含量,进行数据归纳和统计学分析。
结果:视网膜免疫组织化学染色显示:基因干预组和空白对照组与空白干预组相比,视网膜中Rac1、VEGF、HIF-1α和NF-κB的表达较强,空白对照组表达最强。平均光密度值差异具有统计学意义(P<0.05)。 RT-PCR检测显示:Rac1、VEGF、HIF-1α和NF-κB在基因干预组和空白对照组中与空白干预组相比表达较强。但基因干预组与空白对照组相比,上述4个因子表达均下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:从蛋白水平、基因水平证明Rac1-siRNA表达载体能下调多种视网膜内与血管生成相关因子的表达水平,探索其抑制视网膜新生血管生成的分子机制,从而为基因治疗视网膜新生血管性疾病开辟新的研究领域。
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