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EGF通过PI3K/AKT通路诱导人晶状体上皮细胞移行
作者:蒋沁  姚…  文章来源:南京医科大学眼科医院  点击数4114  更新时间:2006/7/11 16:02:40  文章录入:dryaojin  责任编辑:毛进
摘要 目的 研究表皮生长因子(EGF)诱导人晶状体上皮细胞移行及其信号通路机制。方法 培养人晶状体上皮细胞,用不同浓度EGF处理24h后,Phagokinetic Track Motility分析细胞的移动性;EGF(100ng/ml)孵育细胞不同时间后,Western blot法检测磷酸化EGFR、和AKT,并分别用PD153035 (EGFR kinase抑制剂)和LY294002 (PI3K/AKT抑制剂)预孵育细胞,观察上述指标;EGF(100ng/ml)孵育细胞不同时间后,用酶谱法分析MMP-2,并用PD153035、LY294002预孵育细胞,检测MMP-2活性及细胞的移行。设立对照组,结果进行方差分析,p<0.05表明差异有显著性。 结果 EGF可诱导培养人晶状体上皮细胞移行,并随浓度增加细胞的移动性有显著性提高;EGF可诱导EGFR和AKT磷酸化,EGFR抑制剂可阻断EGF诱导的AKT磷酸化;EGF可显著提高细胞中MMP-2的活性,并随时间延长活性增强,PD153035、LY294002可抑制MMP-2的活性以及细胞的移行。 结论 在人工培养的人晶体上皮细胞中,EGFR/PI3K/AKT通路介导了EGF刺激MMP-2的激活和体外培养HLEC的移行,这一通路可被EGFR激酶抑制剂、PI3K/AKT抑制剂阻断,这些涉及的信号通路可能形成潜在的治疗PCO的靶点。
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