| 目的: 巩膜成纤维细胞是视觉信息及机械力学改变引起巩膜重塑过程中的重要效应细胞。进行豚鼠巩膜成纤维细胞的体外培养, 探讨其培养与鉴定方法, 可以为深入了解近视眼发生时其生理功能、生化特征和病理过程提供细胞模型，具有实际意义。
方法: 用器官组织块培养法, 取出生3天内豚鼠后部巩膜组织,剪成1×1×1mm3 大小的组织块接种于25cm培养瓶壁上,加入含10%胎牛血清及双抗溶液的DMEM培养液，置37℃、体积分数为5%CO2、饱和湿度培养箱中培养。当细胞生长至80%融合时,用浓度为0.25%的胰蛋白酶消化,传代。取2～3代细胞制备细胞铺片检测波形蛋白的表达。
结果: 在组织块接种后7～9d可见细胞从组织块边缘长出。倒置相差显微镜下观察,刚从组织块长出的巩膜成纤维细胞呈星形,培养数天及传代培养时细胞透亮呈梭形。在细胞密度较低时细胞排列成网状,密度较高时呈束状。波形蛋白染色阳性, 证实培养的细胞为巩膜成纤维细胞。
结论: 培养的大量细胞可用于研究近视眼巩膜重塑机制和治疗的体外实验研究, 波形蛋白表达检测是鉴定巩膜成纤维细胞一种较好的指标。
[关键词] 巩膜成纤维细胞; 体外培养; 器官组织块培养法;豚鼠
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