| 目的：分析抗CXCR4多肽对小鼠脉络膜黑色素瘤肝脏微转移的抑制作用。
方法：1. 采用Western blot方法及RT-PCR检测CXCR4在B16SL9细胞内的表达。
2. 将B16LS9分为加SDF-1及抗CXCR4多肽培养液组、加SDF-1培养液组和加普通培养液组。分别对其进行invasion assay以分析抗CXCR4多肽在体外对肿瘤转移的影响。
3. 进行B16LS9细胞培养并建立小鼠模型。将5×105 cells/2.5 μl的B16LS9黑色素瘤细胞分别注入24只小鼠右眼脉络膜上腔。24只小鼠被平分为3组(n=8)，分别为 组１：在种植B16LS9黑色素瘤3天前腹腔内注射1mM多肽；组2：在种植B16LS9黑色素瘤细胞当天腹腔内注射1mM多肽；组3在种植B16LS9黑色素瘤细胞当天腹腔内注射PBS。在种植肿瘤细胞后第7天摘除小鼠右眼，第28天处死小鼠并收集肝脏。
4. 对小鼠葡萄膜黑色素瘤原发病灶及肝转移病灶进行免疫组化分析（anti-CXCR4,MMP-2，Ki－67）。并对肝脏微转移灶进行计数比较。
结果：1. 在B16LS9中有CXCR4的表达。
2. 体外实验中抗CXCR4多肽可明显减少B16LS9细胞的跨膜转移。
3. 2 组及3组原发病灶及肝转移病灶其anti-CXCR4及MMP-2表达率均明显高于1组。平均肝脏微转移病灶数为：组1：67.43±27.36; 组2: 171.14±65.87; 组3: 145.71±112.35.组1与组2,组1与组3之间均有显著性差异。但是组2与组3之间没有显著性差异。
结论：此试验表明抗CXCR4多肽对小鼠脉络膜黑色素瘤肝脏转移确有抑制作用。
|
