目的:体外组织培养牛晶状体后囊模拟后囊混浊(posterior capsule opacification,PCO)的形成,观察PCO形成过程中晶状体上皮细胞的增殖分化规律和普拉洛芬(Pranoprofen)对体外PCO形成的影响。
方法:在无菌条件下,将分离的牛晶状体后囊细胞面朝上平铺于25ml培养瓶底部,分别加入含0、10%、20%胎牛血清的DMEM培养液培养1~5周。用方格图计数板计数后囊晶状体上皮细胞的覆盖率和融合时间,并用Giemsa染色和扫描电镜观察细胞的形态。同时在含0和2%胎牛血清的培养基中加入普拉洛芬,使其成为体内代谢4小时后的房水内浓度(0.23 mg/L),进行体外培养,观察与对照组后囊上皮细胞融合时间有无差异。
结果:赤道部的晶状体上皮细胞向后囊中心部迅速增殖、迁徙,一般约需8~18天达到融合。细胞的增殖覆盖率和融合时间对培养液中血清的含量有依赖性(P<0.05)。后囊形成明显的混浊和皱缩,培养液中有无血清均可出现后囊皱缩,且血清的含量越高,皱缩形成的数目越多,时间越短。对皱缩区域的Giemsa染色和扫描电镜观察显示:各皱缩纹理排列几乎平行,皱缩边缘有大量的晶状体上皮细胞聚集,且细胞的聚集方向与皱缩纹理的长轴平行。在两种培养状态下,普拉洛芬在体内代谢4小时后的房水内浓度(0.23 mg/L)对后囊上皮细胞的融合有抑制作用(P<0.01)。
讨论:组织培养条件下的后囊能出现许多与体内PCO相似的超微结构改变,后囊组织培养模型是一种简单、有效的体外研究后囊混浊的方法。普拉洛芬是一种安全、有效的降低PCO发生率的药物,它可作为白内障术后的常规用药。
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