目的 探讨TNF-α对体外培养的人角膜上皮细胞基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2、9)表达的影响;研究粘着斑激酶(FAK)在调节MMP-2、9分泌中的作用,分析HSK中角膜上皮细胞分泌MMP-2、9的可能机制以及对HSK治疗的潜在作用。
方法 组织块法培养人角膜上皮细胞。通过不同浓度TNF-α(0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL TNF-α的干预组及对照组)诱导24h后,裂解细胞提取蛋白行Western Blot分析MMP-2、9及FAK蛋白的表达,免疫沉淀+Western Blot检测磷酸化FAK的表达,并收集细胞培养液行Zymography检测MMP-2、9的活性。结果通过计算机图像分析并进行统计学检验。
结果 与对照组相比,TNF-α可明显刺激人角膜上皮细胞MMP-2、9的表达量,并增强其活性(P<0.05);同时检测到FAK蛋白表达量及磷酸化水平明显上调(P<0.05)。
结论 TNF-α可能通过激活FAK信号转导通路来刺激MMP-2、9的表达,这可能是HSK中MMP表达的调控机制之一。
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