| 背景和目的
以往研究表明氧化损伤是年龄相关性白内障发生的最根本因素，并发现日常饮食中的抗氧化剂类黄酮（flavonoid）对白内障的发展有明显影响，人类饮食中最重要的类黄酮是槲皮素（Quercetin）。本实验的目的是研究Quercetin对人类晶状体上皮细胞human lens epithelial cells (HLECs)的影响，包括保护和毒性作用。
方法
HLECs预先在完全培养基中孵育24小时，然后在含Quercetin和DMSO (dimethyl sulphoxide)的完全培养基中孵育48小时，Quercetin的终浓度分别为0、0.1、1、10、25、50、100μmol/L，DMSO的终浓度为1% v/v。HLECs活力使用MTT法（3- (4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) colorimetric assay）测量。采用流式细胞仪（flow cytometer，FCM）和TUNEL（terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP - mediated biotin nick end labeling）方法检测细胞凋亡，采用RT-PCR（reverse transcription-polymerase chain reaction）检测凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-xl和Bax mRNA表达水平的变化。
结果
1% v/v DMSO降低HLECs活力，引起细胞凋亡和Bax mRNA表达上调，0.1μmol/L的Quercetin可抑制这些效应，保护HLECs免受DMSO的毒性损伤。同时本实验表明HLECs的活力随着Quercetin孵育浓度的增大而降低，呈剂量依赖性，细胞凋亡的比例与细胞活力的下降非常接近，Bax mRNA的表达也逐步上调。
结论
Quercetin在低浓度（0.1μmol/L）对HLECs具有保护作用，可反转1% v/v DMSO对HLECs的毒性损伤。随着浓度的增加，Quercetin对HLECs产生剂量依赖性毒性作用，引起凋亡基因的表达和HLECs的凋亡，LD50为90.85μmol/L。
|
