| [摘要] 目的 探讨高糖对体外培养的大鼠视网膜Müller细胞的活性和谷氨酸代谢功能有否改变及其可能机制。方法 将体外培养的大鼠Müller细胞随机分为正常葡萄糖组（5mMol/l）和高糖组（25mMol/l），培养24h后MTT自动比色法测定两组细胞的活性情况，采用间接荧光免疫组化法和western blot 蛋白印迹法检测两组细胞胶质纤维酸性蛋白（glia fibrillary acidic protein, GFAP）和磷酸化的信号转导及转录活化因子3（phosphorylated signal transducers and activators of transcription3， pSTAT3）的表达情况；采用间接荧光免疫组化法检测两组细胞谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase，GS）和c-Jun的表达变化，并用实时定量逆转录聚合酶链反应法（Realtime PCR）检测GSmRNA和c-JunmRNA的表达改变。结果 MTT自动比色法显示高糖状态下细胞活性提高，与对照组相比差异有统计学意义；与对照组相比，高糖组细胞GFAP、pSTAT3和c-Jun的表达都升高，而GS的表达降低，同时GSmRNA的表达降低、c-JunmRNA的表达升高。结论 经高糖处理的Müller细胞活性提高，其可能机制与GFAP和pSTAT3的表达升高有关；同时发现GS的表达下降，可能机制为激活了c-Jun基因。Müller细胞由于谷氨酸循环中的关键酶GS的表达减少而代谢谷氨酸的能力下降，这可能是糖尿病视网膜病变中导致神经节细胞死亡的原因之一。 |
