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小分子化合物J2抑制小鼠角膜移植排斥反应作用机制的实验研究
作者:王大江 黄…  文章来源:中国人民解放军总医院眼科 北京 100853  点击数1054  更新时间:2007/5/23 15:40:41  文章录入:aya610  责任编辑:毛进
目的:研究同种异基因小鼠角膜移植后植片的生存时间及J2的抗角膜排斥反应的作用,从而探讨新型药物J2对于角膜移植排斥反应的作用机制。方法:建立以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体的角膜移植实验模型,随机分为A、B、C、D、E五组,每组20只。A组为空白对照组,B组为自体原位移植组,C、D、E组均采用C57BL/6-BALB/c同种异体角膜移植模型,术后采用腹腔注射给药,自手术当日开始, B组、C组给予不含药物的安慰剂,D组给予CsA10mg/kg,E组给予J2 15mg/kg,每天1次,连续给药12d。观察各组植片生存指数变化,HE染色及冰冻切片CD4、CD8免疫组化观察角膜植片病理改变。分别在术后1w、2w、3w、4w行RT-PCR检测角膜植片中RANTES、IL-2、IL-10及IFN-γ等细胞因子的表达。结果:同种异体移植安慰剂组角膜植片平均存活时间为18.87±4.19d,J2组发生排斥时间明显延迟为33.12±6.80d,两组比较具有统计学差异(P=0.000),但J2组与CsA组比较无统计学差异。组织学检查证实,术后21天见大量细胞浸润,而J2组未见细胞浸润。免疫组化显示术后21天安慰剂组角膜植片大量CD4+和CD8+T淋巴细胞浸润,J2组植片仅有少量的CD4+和CD8+T淋巴细胞浸润。RT-PCR结果显示:在正常小鼠角膜未见RANTES、IFN-γ、IL-2 及IL-10基因表达。自体移植组RANTES、IL-2、IL-10和IFN-γ基因在第1周均有少量表达,而其它3周没有显著表达;异基因移植组从第1周开始表达各种基因,第3周表达明显增强;J2组从第1周开始表达,第2、3周表达减弱,第4周表达强于前3周。结论:J2在小鼠角膜移植模型具有抗角膜移植排斥作用,其抗排斥作用与CsA 相近;Th1细胞在异基因小鼠角膜移植中起主要作用,而Th2细胞起次要作用;J2能够抑制T细胞活化,减少Th1细胞因子分泌的作用,但并没有诱导出免疫耐受;RANTES基因参与了异基因小鼠角膜移植排斥反应,J2可以抑制其表达。
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