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视网膜色素上皮细胞吞噬时细胞内信号传导通路的研究
作者:安刚  文章来源:辽宁 锦州市中心医院眼科 121000  点击数893  更新时间:2007/5/24 15:12:51  文章录入:aya610  责任编辑:毛进
目 的通过采取体外培养人视网膜色素上皮细胞(RPE),动态检测人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,HRPE)细胞特异性及非特异性吞噬过程中Ca2+浓度变化,明确Ca2+在HRPE的吞噬功能中所起的作用。 方法 用1×107 个/ml ROS于37℃孵育培养的正常HRPE细胞,在孵育的不同时间终止吞噬反应。用双重荧光标记法检测HRPE细胞吞噬动力学,用荧光显微镜Fura-3荧光负荷技术联合冷CCD计算机成像分析系统检测相应时间点的HRPE细胞特异性及非特异性吞噬时的Ca2+浓度。 结 果 1.特异性吞噬的启动明显早于非特异性吞噬。15minROS结合于RPE细胞表面,1.5h色素颗粒才结合于RPE细胞表面。 2.特异性吞噬组(ROS组):细胞内钙离子在15min出现了一个突然升高的峰,并在吞噬过程中一直维持高峰。经统计学检验与静息状态下的钙离子浓度有明显差异(P<0.05)。 3.非特异性吞噬组(色素颗粒组):在非特异性吞噬过程中细胞胞浆内钙离子未有明显变化,经统计学检验与静息状态下的钙离子浓度无明显差异(P>0.05)。 结 论 1.HRPE细胞特异性吞噬过程中结合及吞入的启动早于非特异性吞噬。 2.Ca2+参与特异性吞噬过程,对吞入过程的维持十分重要,但不参与HRPE细胞非特异性吞噬的直接调节。说明特异性吞噬与非特异性吞噬在信号传导方面有着明显的不同。
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