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| EPO促培养视网膜神经细胞轴突生长及其拮抗谷氨酸兴奋毒性作用的研究 |
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| 作者：钟一声,姚… 文章来源：200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院眼科 点击数1346 更新时间：2007/5/25 22:01:46 文章录入：yszhong2000 责任编辑：毛进 |
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| 目的：观察促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）对培养视网膜神经细胞胞体直径和轴突长度以及EPO对谷氨酸毒性作用下培养的视网膜神经细胞存活和凋亡的影响。
方法：用免疫细胞化学法检测培养视网膜细胞EPO和EPO受体（erythropoietin receptor,EPOR）的表达；在培养液中分别添加1.0U/ml、3.0 U/ml和6.0 U/ml的EPO培养细胞96小时后，予苏丹黑B染色,图像分析法测量各组培养视网膜神经细胞胞体直径和轴突长度；分别将0.3 U/ml、1.8 U/ml和3.0 U/ml的EPO作用于无血清培养的视网膜神经细胞18和36小时；或作用于无血清培养的视网膜神经细胞12小时后，再分别加入5mmol/L和10mmol/L谷氨酸溶液继续培养36小时后，用MTT法检测细胞的存活和流式FITC-Annexin V/PI双标法检测细胞凋亡。
结果：1.混合培养的视网膜神经细胞均有EPO和EPOR表达；2. EPO对视网膜神经细胞的胞体直径无明显影响（P>0.05）；3.培养视网膜神经细胞的轴突长度随着EPO浓度的升高而增长，呈剂量依赖性，EPO浓度为6.0 U/ml时，可达对照组的162.8%；4.各浓度的EPO(0.3 U/ml、1.8 U/ml和3.0 U/ml)对无血清培养的视网膜神经细胞的存活(18小时P=0.815,0.998,0.521；36小时P=0.392,0.807,0.765)和凋亡(早期凋亡率P=0.814，0.772，0.913；晚期凋亡率P=0.391，0.567，0.598；总凋亡率P=0.582，0.567，0.724)均无影响；5. 谷氨酸浓度为5mmol/L时, 0.3 U/ml，1.8U/ml，3.0 U/mlEPO均能明显提高培养细胞的存活（P=0.039,0.023,0.001），减少培养神经细胞的早期凋亡率（P=0.006,0.000,0.000）；1.8U/ml和3.0U/mlEPO能减少培养神经细胞的总凋亡率(P=0.016,0.000)。谷氨酸浓度为10mmol/L时，3.0 U/mlEPO能明显提高培养细胞的存活(P=0.000)；1.8U/ml和3.0U/mlEPO能显著减少早期凋亡率(P=0.000,0.000)；3.0 U/mlEPO能显著减少培养神经细胞的总凋亡率（P=0.002）。
结论：一定浓度的EPO在体外短期内能够促进培养视网膜神经细胞的轴突生长。EPO对无血清培养的视网膜神经细胞的存活和凋亡无影响，但能促进谷氨酸兴奋毒性作用下培养的视网膜神经细胞的存活。
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