目的:研究铜绿假单胞菌的DNA旋转酶 A亚单位(GyrA)和拓扑异构酶Ⅳ C亚单位(ParC)基因突变与其对氧氟沙星耐药性产生的关系。方法:从细菌性角膜炎患者中收集分离到对氧氟沙星敏感的铜绿假单胞菌1株,在实验室利用平板法,大量增菌,药物筛选出一株自发性耐氧氟沙星菌株。在其耐药决定区包含有高频突变位点的碱基序列两侧设计特异引物。GyrA1:5/ -AACAAGCCCTACAAGAAATCCG-3/;GyrA2:5/-CCTGGCCGTCTACCAGCAT-3/.ParC1:5/-ATGCCGATTCCAAGCACAAG-3/;ParC2:5/-GAGCAGCACCTCGGAATAGC-3/。PCR扩增并测序分析。结果:自发性耐药菌GyrA亚单位氨基酸序列第87位所对应密码子的碱基G缺失,导致开放读码框移位。自发性耐药菌和临床分离敏感菌株的ParC基因片段,测序结果完全一致。结论:该例铜绿假单胞菌对氧氟沙星自发性耐性产生和GyrA基因喹诺酮耐药决定区的第87位氨基酸所对应密码子碱基缺失突变有关。而ParC基因片段未发生突变。
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