本文将羊膜提取液应用于准分子激光屈光性角膜切削术(PRK)后的兔眼表面,旨在探讨羊膜对PRK术后伤口愈合过程的影响及其作用机制,以期探索出减轻PRK术后角膜上皮下混浊(Haze)产生的新途径。
方法 本试验采用健康无眼疾的新西兰大白兔18只共36只眼,在相同条件下,采用德国视明公司生产的第五代准分子激光治疗仪(Multiscan准分子激光治疗仪)制造PRK动物模型(PTK模式下去除兔角膜上皮,PRK治疗模式下按-10D、6.5mm切削直径进行角膜切削)。术后实验动物完全随机分为实验组、对照组、空白组,每组6只兔,12只眼。其中实验组滴用羊膜提取液,对照组用0.1%磷酸地塞米松眼液,空白组用不含羊膜提取液的赋形剂,术后每天观察眼部大体情况。在术后1周、4周及8周,在裂隙灯显微镜下观察所有实验兔Haze的产生情况,按Fantes分级进行评分,行眼前节照相记录haze的形态,进行统计学分析。之后每组处死2只实验兔,取双眼角膜行光镜检查,在光镜下对术后三组1、4、8周的兔眼测量角膜切削区中央上皮增生厚度,并进行统计学分析;对角膜切片作胶原染色,观察角膜基质中胶原增殖程度。
结果 PRK术后早期,3组动物角膜荧光素钠染色均为阳性,但多数角膜上皮缺损均在术后4~6d修复,且羊膜组角膜上皮愈合速度较其他两组要快。术后一周,在光学显微镜下,三组角膜上皮细胞均已完全覆盖激光切削面,新生的角膜上皮细胞层数多,基底层上皮细胞大小不一。术后4周,三组覆盖切削区的角膜上皮细胞仍有轻度增生,空白组前基质层内较多新生胶原,排列不规则,失去板层结构,瘢痕形成。术后8周,三组角膜上皮仍未恢复至正常厚度,空白组前基质见大量新生胶原纤维,排列极不规则。羊膜提取液组激光切削区中央的角膜上皮细胞增生厚度小于激素组和空白组,有显著性差异(p<0.05)。
所有术眼均在术后一周左右开始出现程度不同的haze,术后三、四周时haze尤其明显,直至术后8周。羊膜提取液组角膜haze形成程度明显低于激素组和空白组,有显著性差异(p<0.05)。
结论 本实验表明,准分子激光屈光性角膜切削术后滴用羊膜提取液是安全有效的,它能减轻术后的角膜伤口愈合反应,有效减轻术后haze的形成。其机制可能为羊膜提取液中包含羊膜的有效成分,可渗入到角膜组织中,并通过角膜细胞因子的相互作用,影响到上皮的愈合,并在上皮基质的相互作用下,减少胶原增生、瘢痕形成,完成角膜基质的重塑过程。
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