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防腐剂对兔角结膜上皮细胞毒性及玻璃酸钠保护作用的实验观察
作者:张琛 王志…  文章来源:首都医科大学附属北京同仁眼科中心北京市眼科研究所 100005  点击数1504  更新时间:2007/5/29 14:40:21  文章录入:张琛  责任编辑:毛进
摘要 目的:观察玻璃酸钠(sodium hyaluronate,SH)对三种防腐剂致兔角膜和结膜上皮细胞毒性的保护作用 方法:体外常规方法培养兔角膜和结膜上皮细胞。实验分为防腐剂组,防腐剂-HA组和培养基对照组;研究选用防腐剂羟苯乙酯(0.03%,0.06%,0.12%),山梨酸(0.1%,0.2%)以及苯扎溴铵(0.0025%,0.005%,0.01%);选用SH的浓度为0.4%。分别与所培养细胞作用1h,3h,5h后,利用LIVE/DEAD细胞活性/毒性检测方法观察细胞酯酶及细胞膜透通性变化,并计算细胞存活率。 结果:所观察的三种防腐剂与细胞作用后不同时间点,角膜和结膜上皮细胞存活率均低于对照组,并且与浓度和作用时间呈依赖关系(P<0.05)。其中0.01%苯扎溴胺对细胞存活率影响最大,0.03%羟苯乙酯影响最小(P<0.05)。防腐剂组各时间点结膜上皮细胞的存活率均低于角膜上皮细胞(P<0.05)。羟苯乙酯-SH组及山梨酸-SH组在各时间点角膜和结膜上皮细胞存活率均高于同浓度防腐剂组(P<0.05),但随时间的增加,防腐剂-SH组细胞存活率降低(P<0.05)。0.005%浓度以上苯扎溴胺-SH组与同浓度防腐剂组相比,细胞存活率无明显差异(P>0.05)。 结论:三种防腐剂中苯扎溴胺毒性最大,羟苯乙酯毒性最小。三种防腐剂对结膜上皮细胞的毒性作用大于角膜上皮细胞。SH对羟苯乙酯和山梨酸均有较好的保护作用,但其保护作用随时间的增加而减弱。
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