| 目的
检测成骨不全一家系基因突变及初步探讨其眼部特征
方法
抽取17名家系成员外周血，提取及鉴定其基因组DNA；选择与已知致病基因紧密连锁的微卫星分子标记，进行等位基因共享分析和排除性分析；利用LINKAGE软件对基因分型结果进行连锁分析，利用Cyrillic 2.0软件进行单体型构建；对候选区域进行基因克隆，PCR扩增，扩增产物进行测序；利用DHPLC对基因突变进行鉴定；对已确认的突变进行生物信息学分析。
对家系成员Ⅴ:3进行详细的眼部检查，并测量部分眼部参数，包括：视力、眼压、眼轴长度、中央角膜厚度、角膜曲率。
结果
等位基因共享分析将致病基因定位于COL1A1，并排除了COL1A2基因；单体型分析显示微卫星分子标记D17S1293，D17S1180，D17S1319，D17S788在家系患者中出现共享；连锁分析显示，在θ=0时，致病基因与微卫星D17S1180，D17S1319紧密连锁（LOD值分别为2.91，2.20）；对COL1A1基因进行测序，发现第2464位碱基（位于36号外显子）由野生型C突变为T（C2464T），所编码的氨基酸由谷氨酰胺（Gln）变为了终止子（Q644X）；利用DHPLC对该家系其他成员及100例正常人的COL1A1基因36号外显子扩增产物进行鉴定，发现突变仅存在于患者，非患者及100例正常人中未检测到突变。生物信息学分析显示COL1A1基因644位氨基酸位点（谷氨酰胺）位于一个高度保守的区域。
临床检查发现家系成员中所有患者巩膜均呈淡蓝色；家系成员Ⅴ:3的眼部参数测量结果为：视力OD 20/10，OS 20/10；眼压 OD 14.7mmHg，OS 18.3mmHg；角膜曲率 OD K1 43.3D，K2 43.6D；OS K1 43.0D，K2 44.0D；眼轴长度 OD 24.03mm，OS 24.23mm；中央角膜厚度 OD 434mm，OS 441mm。
结论
1. COL1A1基因Q644X突变可以导致成骨不全。
2. 成骨不全患者中央角膜厚度偏薄。
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