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脂质体介导兔角膜内皮细胞基因转染的观察
作者:毛晓春 张…  文章来源:华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科,武汉 430030  点击数945  更新时间:2007/5/30 19:51:49  文章录入:maoxc  责任编辑:毛进
目的 观察阳离子脂质体LipofectamineTM 2000是否能介导目的基因转移至兔角膜内皮细胞,优化阳离子脂质体转染CECS的条件。 方法 采用细胞培养方法,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,通过体外细胞转染实验,用不同的细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间优化转染条件,荧光显微镜观察目的基因的表达。  结果 角膜内皮细胞内可见脂质体介导的绿色荧光蛋白表达,LipofectamineTM在细胞融合度为80%~90% ,脂质体/DNA为3μl/μg,脂质体的量为1.8μl,转染时间为5 h时,转染效率最高; 结论 阳离子脂质体可有效介导目的基因转移至角膜内皮细胞内,GFP可作为报告基因优化脂质体转染条件。
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