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| 小鼠前房相关免疫偏离形成中Tim-3的表达和意义 |
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| 作者：王毓琴,杨… 文章来源：温州医学院附属眼视光医院,325027 点击数1013 更新时间：2007/5/30 23:01:29 文章录入：nightlight2046 责任编辑：毛进 |
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| 目的:建立BALB/c小鼠的前房相关免疫偏离（ACAID）模型，探讨脾脏和引流淋巴结组织中Tim-3分子的动态表达及其意义。 方法:用乙醚吸入麻醉BALB/c小鼠，在ACAID实验组小鼠进行右眼前房注射OVA抗原后进行皮下免疫注射OVA与完全弗氏佐剂（CFA）混合液，按照前房注射与皮下免疫注射之间所间隔时间点的不同，又将实验组分为0、3、7、14、21、28 d亚组；以仅进行皮下免疫的小鼠作为阳性对照组，未接受任何处理的小鼠作为正常对照组。观察迟发型超敏反应（DTH），评价ACAID的形成。在皮下免疫注射7天后处死动物，获取脾脏和引流淋巴结组织制备成单个核细胞悬液，采用荧光定量PCR技术和流式细胞术分别检测Tim-3的mRNA及蛋白表达水平，以CD25分子评价CD4+Tim-3+ T细胞的活化状态。 结果:0 d、3 d组小鼠的DTH反应程度与阳性对照组相似（P>0.05），而7 d、14 d、21 d、28 d组小鼠的DTH反应明显受到抑制（P<0.01）。实验组小鼠的脾脏Tim-3 mRNA的表达水平在3 d亚组中明显增高，与阳性对照组相比差异有统计学意义（P < 0.01）；而在7 d亚组中有所降低，但仍高于阳性对照组的表达水平（P < 0.01）；在14、21、28 d亚组中，Tim-3 mRNA的表达水平逐渐接近于正常对照组的水平（P > 0.05）。在实验组的各个时间点小鼠的脾脏中，CD4+CD25+Tim-3+ T细胞阳性率的变化趋势与CD4+Tim-3+ T细胞阳性率的变化趋势相一致，即在3 d亚组中明显增高，在7、14 d亚组中逐渐降低，在28 d亚组中下降至正常对照组的水平；而实验组的各个时间点小鼠的脾脏中，CD4+CD25－Tim-3+ T细胞的阳性率较恒定，且与阳性对照组相比无统计学意义（P > 0.05）。在实验组的各亚组小鼠的引流淋巴结组织中，Tim-3mRNA及蛋白表达水平无明显变化。结论:脾脏而不是引流淋巴结组织中Tim-3分子的表达在ACAID的形成过程中呈动态变化，其mRNA和蛋白表达水平在3 d亚组中均明显升高，早于ACAID的形成时间，提示脾脏Tim-3分子可能参与了ACAID的形成。 |
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